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本蝇BM750500过250M:DNA标样bp时①电泳结果支持D1基因位于X染色体上，请说明判断依据：②果蝇C的性别为，果蝇B的基肉型为。一根据电泳结果分析，在D基因突变为D1的过程中最可能发生了碱基对的25.(12分)丙酮酸羧化酶(PEP)是控制袖菜中蛋白质与油脂比例的关键酶。通过构建PEP基因的反义基因（将PEP基因反向连接在启动子之后，下称PEP反义基因，此基因在转录时的模板链为PEP基因模板链的互补链)，抑制PEP基因的表达，可提高油菜籽中的油脂含量。下图甲为质粒的构成元件，图乙为PEP基因结构的示意图。复制原点T-DNA右边界1启动子1一pⅡ墙因中一终止子上游下游质粒一启动子2→Bam日上PEP基因g5基因T-DNA左边界终止子Sac I乙(1)提取油菜细胞中的总DNA,根据PFP基因上游及下游的碱基序列设计引物，通过PCR扩增PEP基因。在PCR过程中，引物是酶的结合位点，也是子链延伸的起点。为方便构建PEP反义基因，一般将限制酶的识别序列设计在引物上，在图乙中，PEP基因上游引物中引入的识别序列，下游引物中引大、的识别序列。(2)质粒上的npt-Ⅱ为新霉素抗性基因，us基因控制合成的酶能使阝-葡萄糖苷酸水解为蓝色物质。将用限制酶处理后的质粒和PEP反义基因混合，加入T4DA连接酶连接，再与农杆菌菌液温育一段时间后，涂布到含有新霉素和B-葡萄糖苷酸的平板上。一段时间后，在平板上长出白色和蓝色两种菌落，其中符合要求是一，理由是(3)农杆菌在侵染油菜细胞后，可将质粒上的区域转移并整合到油菜细胞的基因组中，进而稳定遗传。PEP反义基因可有效抑制PEP基因的表达，推测其原理是高物第8页（共8页）》